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丁酸梭菌抑菌实验报告

  • 分类:技术文章
  • 作者:金百合生物
  • 来源:
  • 发布时间:2021-11-15 16:45
  • 访问量:

【概要描述】丁酸梭菌在体内的定植产生大量的丁酸、乙酸、乳酸等短链脂肪酸,以及B族维生素、叶酸和一些消化酶类,促进肠道内有益菌群如双歧杆菌等乳酸菌的增殖,抑制魏氏梭菌、肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的繁殖,减少氨、胺、吲哚等肠道毒素的产生及对肠粘膜的毒害,使肠道内水分潴留明显减少,进而避免了其所导致各种肠道疾病的发生(坏死性肠炎、结肠炎、回肠炎等),恢复肠免疫功能和正常的生理功能,达到无病防病、有病治病的作用。

丁酸梭菌抑菌实验报告

【概要描述】丁酸梭菌在体内的定植产生大量的丁酸、乙酸、乳酸等短链脂肪酸,以及B族维生素、叶酸和一些消化酶类,促进肠道内有益菌群如双歧杆菌等乳酸菌的增殖,抑制魏氏梭菌、肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的繁殖,减少氨、胺、吲哚等肠道毒素的产生及对肠粘膜的毒害,使肠道内水分潴留明显减少,进而避免了其所导致各种肠道疾病的发生(坏死性肠炎、结肠炎、回肠炎等),恢复肠免疫功能和正常的生理功能,达到无病防病、有病治病的作用。

  • 分类:技术文章
  • 作者:金百合生物
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  • 发布时间:2021-11-15 16:45
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1  实验材料
共培养用液体培养基、LB培养基

2  实验方法
2.1 丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌的抑制作用。
①霍乱沙门氏菌种子培养:取平板活化好的菌种转接到LB液体三角瓶中,装液量25 mL/100 mL, 37℃,150 r/min培养12-24h,取培养菌液测活菌数和pH值。
②丁酸梭菌单独培养:取丁酸梭菌菌粉0.1 g接种到装量为25 mL/30mL的细菌培养瓶中,置于37℃静止恒温培养24 h左右。(可按此比例扩大培养体积,最低比例为0.1 g:25 mL)
③丁酸梭菌和霍乱沙门氏菌混合培养:活化好的丁酸梭菌培养液5 mL接种到装液量为20 mL/30mL的细菌培养瓶中,再把培养好的霍乱沙门氏菌菌液1 mL同时接入该共培养液中, 37℃恒温静止培养。对照组为向同样的共培养液体培养基中(装液量为20 mL/30 mL)接种霍乱沙门氏菌菌液1 mL,37℃恒温静止培养。分别在16和24 h测pH值及沙门氏菌活菌数。
④计数采用平板涂布法。选择2~3个适宜梯度稀释液,吸取100 μL涂布平板,倒置于严格厌氧培养箱或严格厌氧培养袋中,37℃培养18~36 h后计数。每个梯度做两个平行,每个平板的菌落数在30~300范围内有效。

2.2 丁酸梭菌对肠出血性大肠杆菌、魏氏梭菌的抑制作用
实验方法同上,魏氏梭菌种子液为严格厌氧,应采用共培养液体培养基。

3  实验结果
3.1  对霍乱沙门氏菌的抑制结果
丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌表现出非常强的抑制作用,24h活菌数从单独培养时2.0×108CFU·mL-1减少到1.2×103CFU·mL-1。
3.2 对肠出血性大肠杆菌的抑制结果
混合培养16h,肠出血性大肠杆菌活菌数从单独培养时3.5×108CFU·mL-1减少到7×106CFU·mL-1,24 h活菌数减少到0.4×106CFU·mL-1,pH从6.8下降至4.6,呈现良好抑制作用。
3.3 对魏氏梭菌的抑制作用
混合培养后,魏氏梭菌活菌数从单独培养时的1×108 CFU·mL-1减少到1×105CFU·mL-1, pH值从6.8下降到4.5,表现出良好的抑制作用。

4  小结
(1)丁酸梭菌为严格厌氧菌,产氢气。液体培养基中加入厌氧指示剂,粉红色表明培养基上层有氧;


培养一段时候后液体表面有气泡,为正常现象。
(2)丁酸梭菌平板形态如下。


(3)丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌、肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌均有显著的抑制作用,可将肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌细菌含量控制在发病浓度之下,防止发病。尤其是对霍乱沙门氏菌抑制作用更强,可以达到净化霍乱沙门氏菌的作用。

5、结论
丁酸梭菌在体内的定植产生大量的丁酸、乙酸、乳酸等短链脂肪酸,以及B族维生素、叶酸和一些消化酶类,促进肠道内有益菌群如双歧杆菌等乳酸菌的增殖,抑制魏氏梭菌、肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的繁殖,减少氨、胺、吲哚等肠道毒素的产生及对肠粘膜的毒害,使肠道内水分潴留明显减少,进而避免了其所导致各种肠道疾病的发生(坏死性肠炎、结肠炎、回肠炎等),恢复肠免疫功能和正常的生理功能,达到无病防病、有病治病的作用。

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