1、概况

鸡坏死性肠炎（Necrotic enteritis，NE）是影响禽类健康的重要疾病之一，主要由A型、C型或G型产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens，C. perfringens）引发。其特征性病理变化为鸡卵黄蒂收缩功能障碍及肠道上皮组织的纤维化与坏死；其临床表现以化脓性或混合性血便为主，并且常与球虫感染或球虫病呈伴发或继发关系。急性及最急性病例可见腹泻、厌食、羽毛竖立、精神沉郁，伴有血便或煤焦油样粪便排出。耐过急性期的病鸡易转化为亚临床病例，表现为轻度腹泻或无腹泻症状，并逐渐发展为慢性消耗性疾病。尽管亚临床型病鸡死亡率较低，但肠道结构破坏会导致消化吸收功能受损，致使肉鸡增重缓慢、出栏时间延迟，进而增加养殖成本。 

2、现状

饲料中抗菌促生长剂、抗生素及抗球虫药物的广泛应用，曾在坏死性肠炎防控中发挥重要作用。然而，长期大量使用抗生素导致严重的细菌耐药性问题，世界各国陆续出台严格的抗生素使用限制或禁用政策，在此背景下，产气荚膜梭菌所致肠炎的发病率呈逐年上升趋势。目前，鸡坏死性肠炎已成为集约化养鸡生产中的关键疾病。据Moore等研究报道，全球养鸡业每年因该病造成的经济损失高达约60亿美元。

1、试验对象：无球虫且无产气荚膜梭菌的 1 日龄岭南黄羽肉鸡在中国农业科学院兰州兽医研究所动物房中饲养。

2、试验材料：巨型艾美耳球虫（广东株）和G型产气荚膜梭菌均由中国农业科学院兰州兽医研究所猪禽黏膜免疫创新团队分离纯化并保存。

3、试验饲料：无抗球虫和无促生长抗生素添加剂的肉小鸡配合饲料。

4、试验设计：

5、试验结果

（1）肠道形态学

与对照组相比，各组均有不同程度肠壁变薄变脆，外翻，还有不同程度的出血，其中最高剂量组有明显的出血点。随产气荚膜梭菌浓度增加，可见小肠组织黏膜上皮细胞脱落，固有层肠腺排列疏松，弥散淋巴组织增多（绿色箭头），固有层暴露（紫色箭头），并有出血（黄色箭头）

（2）肠道上皮完整性

与对照相比，口服灌喂不同剂量的巨型艾美耳球虫及产气荚膜梭菌后，与肠道上皮完整性相关的CLDN-1、CLDN-3、MUC-2及OCLN基因均有不同程度的下降，且与感染剂量成负相关；紧密连接蛋白CLDN-1及OCLN蛋白表达也均有不同程度的下降。

肉鸡小肠的各基因的mRNA表达量的变化

肉鸡小肠的各基因的蛋白表达量的变化

1、试验设计

NC：对照组，正常肉鸡；

CB：正常肉鸡+丁酸梭菌组；

PC：坏死性肠炎组；

NECB1和NECB2为坏死性肠炎肉鸡+丁酸梭菌组：将丁酸梭菌粉末加入肉鸡饲料中，其中丁酸梭菌粉末中菌含量为2×10⁸CFU/g，添加量为200-400g/吨饲料。NECB1在第14-22天饲喂丁酸梭菌，NECB2在第1-22天饲料丁酸梭菌。

2、试验结果

（1）肠道形态学

下图1显示，与对照组相比，PC组的肠壁变薄而脆，并且有明显的出血点。使用丁酸梭菌的NECB2组中出血点减少，肠壁恢复。

下图2显示，对照组可见小肠组织黏膜层结构完整，肠腺数量丰富，排列紧密，上皮细胞形态正常。PC组肠绒毛上皮细胞脱落，固有层裸露。且固有层毛细血管（黄色箭头）轻度充血，肠腺上皮内较多炎性细胞浸润（红色箭头），并可见弥散淋巴组织增多（绿色箭头），并且有胞质嗜酸性增强（蓝色箭头）。使用了丁酸梭菌的NECB1组和NECB2组相似，均表现为组织肠绒毛较短，较多肠绒毛互相融合，肠腺上皮内炎性细胞浸润减少（红色箭头），呈恢复状态。

（2）生长性能

补充丁酸梭菌（NECB1和NECB2）缓解了由坏死性肠炎引起的平均日增重和平均日采食量的减少（图A、B）。同时在14-22天，坏死性肠炎肉鸡料重比增加的现象在补充丁酸梭菌后的NECB1和NECB2组中得到显著改善（图C）。

（3）肠道上皮完整性

坏死性肠炎肉鸡中紧密连接蛋白CLDN-1、CLDN-3、OCLN 和 ZO-1以及黏膜屏障相关蛋白MUC-2的mRNA表达量下降，补充丁酸梭菌（NECB1和NECB2）可以恢复PC组中CLDN-1，CLDN-3，MUC-2，OCLN和ZO-1的下降。

坏死性肠炎导致肉鸡平均日增重和饲料转化率显著降低，补充丁酸梭菌可以显著增加坏死性肠炎肉鸡的平均日增重和饲料转化率；小肠HE切片表明，添加丁酸梭菌可以增加小肠绒毛高度/隐窝深度的比值并减轻坏死性肠炎肉鸡的肠道损伤。综上，在饲料日粮中添加丁酸梭菌可改善坏死性肠炎患鸡的生长性能，维护肠道屏障功能及其完整性。